新霉素软膏属于广谱氨基糖苷类抗生素，对多数革兰阳性及阴性菌，都有较好的抗菌作用，在局限性、原发性脓皮病，如毛囊炎、深脓疮、脓包疮以及局限性、继发性脓皮病，如感染性湿疹性皮炎，感染的皮肤溃疡，擦烂等，单独使用青霉素即可有效。
葡萄球菌的感染最为有效，可以用于杀菌、消炎。
临床上常用于敏感菌所致的皮肤黏膜感染，如脓皮病、化脓性皮肤病和烧伤、溃疡等有继发感染者，一般外用，一日一到两次，有些患者使用后也可以引起皮肤的过敏反应，外用本药物仍可引起肾毒性及耳毒性作用，现在应用比较少。
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